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對293T細胞培養的一些方法總結
更新時間:2019-07-23   點擊次數:1122次

細胞傳代:

當細胞在細胞培養瓶內長滿達到80%時就要傳代,一傳二,24小時后再傳代。48小時傳就不好了,如果在24小時后細胞沒有長到80%,應該換新的培養基,不然,培養基變黃,細胞脫落。

 

細胞消化:

將細胞培養瓶豎立放置,吸走培養基,如果培養基中的脫落細胞較多,說明細胞現在很容易脫落,只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%),來回輕微晃動培養瓶直到細胞*脫落,加入10mlMEM(10%杭州四季青胎牛血清),混勻,不能吹打,分裝2瓶,如果細胞沒長滿就脫落,則只需加入5mlMEM,不分裝。

如果培養瓶中的細胞貼壁較牢固,培養基上清沒有細胞脫落碎片,且細胞長滿達到80%以上,吸走培養基,加入5ml的PBS+EDTA(0.02%),迅速輕微晃動,豎立培養瓶,吸走,加入1ml0.05%胰酶,37度消化不超過3min,細胞*消化脫壁,取出加入10ml培養基輕微吸打混勻,分裝2瓶。

 

培養基:

MEM(GIBCO)+10%胎牛血清(杭州四季青)+雙抗

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