1)要留心避免出現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應顯色。
2)樣本的搜集及血清別離中要留心盡量避免細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發作分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定辦法發作非特異性煩擾。
3)血清標本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
4)冰凍保存的血清標本須留心避免因停電等構成的重復凍融。ELISA試劑盒標本的重復凍融所發作的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發作損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留心,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。
5)標本在保存中如出現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。Elisa實驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診辦法。由于其試劑安穩、易保存,操作簡潔,成果判別較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。