1.每次做盡量要把陰陽空三個對照做好,如出現問題也好剖析.
2.顯色:顯色體系又許多,咱們一開始做的時分,要選擇適宜的顯色體系.留意顯色體系酶活性底物的保存HRP結合物加硫柳泵,AP結合物可加疊氮鈉.
3.加抗體標本(和二抗):留意該換槍頭時換槍頭.標本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋.如需加二抗,還要留意二抗的作業濃度,太高zao蹋,太低則著色淺.
4.洗滌板:可以說在ELISA操作中,洗刷是zui首要的關鍵技術。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,為抵達分離游離的和結合的酶符號物的目的,*殘留在板孔中游離的物質,以及非特異性地吸附的攪擾物質,在洗刷時又應把這種非特異性吸附的攪擾物質洗刷下來。所以在洗板時會有一定差錯,人為因素很大(當然有條件的用洗板機除外),洗的不*或串了孔,對如此靈敏的ELISA體系但是不小的影響。