化學辦法的發展,首要源于生物化學、剖析化學等基礎研討及電子計算機等高新技能的發展?;瘜W已從曩昔的手藝滴定、化合物顏色反響進入一個全新的主動化微量剖析年代。首要運用的生化試劑技能有:
1. 主動剖析與酶法剖析
前30年,我們選用固定時刻測定酶活性,而近20年我們跨過了國外選用分光光度法接連監測酶活性的手藝階段,而一步到位引入主動生化剖析儀選用動力學法接連監測酶活性。新辦法的選用,使我們可剖析的酶范圍擴展,測定精確度和精密度提高,為供給更廣泛的信息;一起主動化剖析促進了酶法對代謝物測定的研討與使用,許多體內的生化反響被模仿,曩昔選用強堿、強酸、火焰等比較激烈的化學反響應被摒棄,代之以溫文、方便、無污染的代謝物酶法測定。離子選擇電極的使用日益增多,并作為模塊組合參加主動化剖析。干化學剖析因為具有簡便、方便、精確的優點,也在國內的許多實驗室,特別是急診室廣泛選用。
2. 分子生物學技能
90年代,確診分子生物學在我國構成?;瘜W范疇里除了對蛋白質、代謝物等分子水平的研討外,選用分子生物學技能可以對某些遺傳病進行產前和出生后的基因確診,對代謝病和腫瘤進行基因變異和流行病學的調查和研討在此基礎上構成了基因水平進行實驗確診的化學分支。
3. 免疫化學剖析
我國70年放射免疫剖析,建立了甲胎蛋白、人絨毛膜促性腺激素、胰島素的房免測定技能。近20年來,跟著免疫學研討的發展,特別是80年代單克隆抗體制備技能的廣泛使用,免疫濁度法、酶免疫、熒光免疫、發光免疫等主動化檢測技能迅速發展,免疫學學科與技能之間的穿插和相互滲透,使越來越多的化學查驗選用了免疫學技能,如apoA I,apoB等載脂蛋白的測定,脂蛋白(a)測定、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)質量測定、肌紅蛋白、肌鈣蛋白、微量白蛋白、前白蛋白、轉鐵蛋白、α1-微球蛋白、銅藍蛋白等特種蛋白的測定,多種激素和醫治藥物的測定,均可選用免疫化學辦法。
4. 生化別離與剖析技能
近20年來生化剖析發展快速。光譜技能已從單一的比色法發展為選用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發射光譜法、分子熒光光譜法。別離技能除了一般的離心和超離心技能外,在層析和電泳技能方面有更廣泛的發展和使用。層析技能如薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜(HPLC)等使用液越來越廣泛,特別是HPLC以其快速、高分辨率在微量代謝物、藥物檢測方面更勝*。電泳技能中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的使用已顯著減少,瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAG)使用增多,目前已有主動電泳儀。等電聚膠電泳、毛細管電泳也在某些化學實驗室開展。跟著分子生物學的發展與核酸分子雜交技能的普及,作為手段的DNAPAG電泳與各種印跡技能已走入化學實驗室。