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關于細胞培育這幾點必定要注意了
更新時間:2021-05-28   點擊次數:1333次

細胞培育技能又叫細胞克隆技能。細胞培育技能指的是細胞在體外條件下的成長,在培育的進程中細胞不再構成安排(動物),今天的文章中跟我們介紹一些關于細胞培育的基礎知識!

一、細胞培育的基本概念
 體外培育(in vitro culture)包括所有結構層次的培育,即:安排培育(tissue culture)、細胞培育(cell culture)和器官培育(organ culture)。
細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出部分安排渙散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞,也可把體外培育細胞渙散成單個細胞在體外條件下培育,細胞能繼續存活與增殖。
 
二、細胞培育意圖與用處
1、科學研討
(1)藥物研討開發,如新藥挑選,疫苗、基因工程藥物、細胞工程藥物研討與開發、單克隆抗體制備等。
(2)基礎研討,如藥物效果機理、基因功能、疾病產生機理等研討。
2、生物制藥
(1)疫苗出產:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。
(2)基因工程藥物出產:如EPO等。
(3)抗體藥物、基因治療藥物出產。
(4)細胞工程藥物出產:生物細胞內的一些生物活性多肽,生物活性物質等。
(5)使用細胞法體外測定生物活性物質的活性;并預測其在體內的藥效和代替體內法檢測其成品的生物活性。
 
三 、原代培育和傳代培育
原代培育(primary culture):將動物機體的各種安排從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械辦法處理,渙散成單細胞,置適宜的培育基中培育,使細胞得以生計、成長和繁衍,這一進程稱原代培育。
 但實際上,通常把第依代至第十代以內的培育細胞統稱為原代細胞培育。
傳代培育(subculture):細胞在培育器皿中成長必定時刻后,被分開接種到新的培育器皿中。
     當原代培育成功今后,跟著培育時刻的延長和細胞不斷割裂,一則細胞之間互相觸摸而產生觸摸性按捺,成長速度減慢甚至中止;另一方面也會因營養物不足和代謝物堆集而不利于成長或產生中毒。此時就需要將培育物分割成小的部分,重新接種到別的的培育器皿(瓶)內,再進行培育。
 對單層培育而言,80%集合或剛集合的細胞是較理想的傳代階段。
 
四、體外培育細胞的方法
 集體培育(mass culture),將含有必定數量細胞的懸液置于培育瓶中,讓細胞貼壁成長,集合(confluence)后構成均勻的單細胞層;
克隆培育(clonal culture),將高度稀釋的游離細胞懸液加入培育瓶中,各個細胞貼壁后,互相間隔較遠,經過成長增殖每一個細胞構成一個細胞集落,稱為克?。╟lone)。一個細胞克隆中的所有細胞均來源于同一個祖先細胞。

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