根據前面說到的ELISA試劑盒質量控制中我們知道,由ELISA的性質和來源,分為可測誤差、隨機誤差、人為誤差。在ELISA試劑盒實驗中,只有遵循它應有的規則才能更好的完成實驗,對此
上海酶聯生物特別為您分析了保證實驗結果的幾大基礎:
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
2.實驗時,要使底物避光保存。
3.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
4.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
5.要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業人員進行矯正。
6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
在操作步驟中,還有這幾個必知項目:
1. 溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
2. 將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
3. 洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
4. 洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5. ELISA試劑盒實驗中,液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
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