胎牛血清從上市以來一直備受爭議,從廠家,價格,鑒別到產品質量,產品如何正確的保存都是些大問題,今天酶聯生物就帶領大家一起來學習如何正確的使用和保存血清。
標準血清的鑒別方法:
血清凝固析出的淡透明液體,如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉化成維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。
胎牛血清的作用:
胎牛血清是細胞培養中用量zui大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
血清保存要點:
1.需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃的低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍于低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或者玻璃瓶凍裂。
2.熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清,加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。
3.瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
4.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
5.血清中的沉淀物,絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量??捎秒x心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量保存/運輸:-5°C~-20°C。
看了這些您知道保存胎牛血清的正確的方式嗎?上海酶聯生物以解決您的問題為己任,不斷完善自身,提高企業文化,以便更好的服務于事業。