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介紹ELISA試劑盒變質的原因有哪些
更新時間:2022-12-26   點擊次數:665次

ELISA試劑盒的好壞會直接影響ELISA實驗的結果,有的時候ELISA試劑盒會出現變質的情況,那么,是什么原因造成ELISA試劑盒變質呢?今天我們就來介紹一下ELISA試劑盒變質的原因。 


1、方法學的影響   

ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。所以說,各種實驗方法在操作過程中可能會導致ELISA試劑盒變質。 


2、試劑因素 

不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量一致,即使是通過批批檢驗的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩定性。對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。 


3、樣本因素 

標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。 


4、操作因素 

ELISA操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。這些步驟在操作過程中,操作不當或者操作時間過長都有可能造成ELISA試劑盒的變質。 


5、常表示結果的常用方法

⑴.定性測定。

⑵.半定量測定 結果一般以滴度表示。

⑶.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。


ELISA實驗過程復雜,影響因素較多,而ELISA試劑盒的有效性是ELISA實驗能夠順利進行的前提,因此在實驗過程中要細心操作,安全保存各種試劑,加大復查力度,確保實驗結果的準確。 


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以上是介紹ELISA試劑盒變質的原因有哪些?

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