ELISA試劑盒實驗看似簡單,其實不然。記得以前一個同學*次做ELISA實驗,跟我說,ELISA實驗簡直太簡單了,到第2次在次做ELISA實驗的時候,他驚訝了,說結果差別怎么這么大(同一份標本),第三次的時候,他決定認真的做一次,爭取做到同一份標本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單,發覺其實挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧,希望對大家有所幫助!
1.操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孑L內滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統一,判斷錯誤。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
ELISA試劑盒的影響因素應選用有國家批準文號,質量靠得住的產品,不能圖便宜,忽視質量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內,在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內用完,剩余的試劑下次用時應先檢查是否變質,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導致錯誤結果。