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上海酶聯Elisa試劑盒檢驗方法
更新時間:2024-06-25   點擊次數:577次

Elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,然而實驗新手們面對各種各樣、動則上上千種的Elisa試劑盒,內心應該是崩潰的。

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Elisa試劑盒的操作

(一)檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。

2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,置37℃反應30分鐘。

5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。

9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。

(二)樣品準備

1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

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