一、植物細胞試驗原理
植物的性:植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的才能,稱為植物的性。
植物安排培育便是利用植物的性進行離體無菌植物培育的一門技術。
植物安排培育按其原始意義,便是指愈傷安排培育。但開展至今,其范圍日益擴大,已包括植物和它的離體器官、安排、細胞和原生質體的離體無菌培育。
二、試驗目的
植物細胞和安排培育的技術性強,要求無菌操作,通過本試驗可初步掌握慣例的安排培育技術,加深對無菌操作的了解。
三.試驗資料
儀器設備:1.酒精燈、三角燒瓶,培育皿;2.鑷子、剪刀、剖針;3.雙筒解剖顯微鏡;4.光照培育箱或溫室;
資料煙草無菌苗、豌豆幼苗。
試劑
(1)MS培育基,植物激素:NAA、6-BA等;
(2)飽滿漂液(次氯酸鈉);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)無菌水
四.植物細胞試驗過程
豌豆苗的莖尖培育
① 取發芽6天的豌豆幼苗10株,簡取1厘米左右的莖尖,浸入70%的酒精中1分鐘,再浸入飽滿次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘,(此步今后要求無菌)用無菌水中沖刷5次,在滅菌的濾紙上吸干水分,放入滅菌的培育皿中。
② 在雙目解剖鏡下,用滅菌的解剖針剝去幼葉顯露生長錐,用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐。
③ 將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-芐基腺嘌呤(6-BA)的培育基上誘導愈傷安排構成,用封口膜將培育皿封好。
④ 在恒溫培育箱中,26℃下,培育六周,構成愈傷安排,經繼代后,可用于生根培育