1.取出ELISA試劑盒室溫平衡30min,取出血樣放至室溫。
2.配標準品:取150uL標準品參與150uL標準品稀釋液稀釋,順次稀釋5次。
3.加樣:分別于各反應孔中參與標準品50uL,樣品40UL,標準品做復孔,樣品做3孔。
4.分別于樣品孔中參與10UL抗體。
5.標準品和樣品孔中分別參與50uL鏈酶親和素-HRP,蓋上封板膜,悄然轟動混勻,37℃溫育60min。
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6.配洗刷液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗刷:留神揭開封板膜,棄去液體,甩干,每孔加200uL洗刷液,靜置30s后棄去,如此重復5次,拍干。
8.ELISA試劑盒顯色:每孔先參與顯色劑A 50uL,再加顯色劑B 50uL,悄然轟動混勻,37℃避光顯色6min。
9. 中止:每孔參與中止液50uL,中止反應(此時藍色當即轉為)。
10.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加中止液10min之內進行。
11.保存效果,收拾桌面。
12.分析處理數據