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1．取出ELISA試劑盒室溫平衡30min，取出血樣放至室溫。

2．配標準品：取150uL標準品參與150uL標準品稀釋液稀釋，順次稀釋5次。

3．加樣：分別于各反應孔中參與標準品50uL，樣品40UL，標準品做復孔，樣品做3孔。

4．分別于樣品孔中參與10UL抗體。

5．標準品和樣品孔中分別參與50uL鏈酶親和素-HRP，蓋上封板膜,悄然轟動混勻，37℃溫育60min。
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6．配洗刷液：將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

7．洗刷：留神揭開封板膜，棄去液體，甩干，每孔加200uL洗刷液，靜置30s后棄去，如此重復5次，拍干。

8．ELISA試劑盒顯色：每孔先參與顯色劑A 50uL，再加顯色劑B 50uL，悄然轟動混勻，37℃避光顯色6min。

9． 中止：每孔參與中止液50uL，中止反應（此時藍色當即轉為）。

10．測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加中止液10min之內進行。

11．保存效果，收拾桌面。

12．分析處理數據