ELISA實驗通用規則
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但最好有專業人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
4、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
5、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
6、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、實驗時,要使底物避光保存。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
11、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細節:
1. 嚴格按照規定的時刻和溫度進行溫育以保證成果。一切試劑都必須在運用前到達室溫20-25℃。運用后當即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確能夠導致不的成果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的色彩,現已變藍的底物液不能運用。
5. 防止試劑和標本的穿插污染以免形成錯誤成果。
6. 在儲存和溫育時防止強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。
9. 不能運用過期產品。
10. 假如可能傳播疾病,一切的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測設備。