產品時間:2019-04-11
小鼠正常肝細胞(NCTC 1469)公司一直腳踏實地,深耕市場,洞察廣大消費者的需求,為消費者提供高品質產品而努力,一切從客戶需求出發,為客戶需求打造專業的細胞產品,是我司能一直跑在市場前沿的秘訣所在,為回饋客戶,特展開8折優惠溫暖沖擊波活動,盡情享受吧!
小鼠正常肝細胞(NCTC 1469)
細胞介紹
1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。細胞特性
1)來源:小鼠的肝組織
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>lxl06個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1.收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養約2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4.如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附 帶的*培養基。
5.接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我 們取得電聯。
細胞用途:僅供使用。
小鼠正常肝細胞(NCTC 1469)本公司的細胞培養操作規程,供參考
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO);馬血清,10%;雙抗
1%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。 第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培
養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部 分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的 培養基終止消化。
輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘, 棄去上清液,加入lmL培養液后吹勻。
移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養 基的T-75培養瓶中培養。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,細 胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為 10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管中,注意凍存 管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠正常肝細胞(NCTC 1469)注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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